Rengjøring av ambulanser krever balansering av generell kjøretøyhygiene med spesifikke medisinske sikkerhetskrav; den er vanligvis delt inn i tre komponenter: utvendig rengjøring, innvendig rengjøring av hytter og desinfeksjon av medisinsk utstyr. Utvendig rengjøring fokuserer først og fremst på å fjerne gjørme, støv og forurensninger; Dette oppnås vanligvis ved å skylle med vann sammen med et nøytralt vaskemiddel, samtidig som man strengt unngår bruk av sterkt etsende kjemikalier for å forhindre skade på kjøretøyets lakk og advarselsmerker.
Gitt at den indre kabinen fungerer som et rom for medisinske prosedyrer, er rengjøringsstandardene for dette området betydelig strengere. Umiddelbart etter fullføringen av hvert pasienttransportoppdrag, må alle rusk eller forurensninger i kabinen umiddelbart fjernes. Videre må høye-berøringsflater-som bårer, seter, rekkverk og gulv-gjennomgå grundig desinfisering. Dette oppnås vanligvis ved å tørke eller spraye disse overflatene med desinfeksjonsmidler som oppfyller etablerte medisinske standarder, og dermed sikre effektiv eliminering av bakterier og virus og forhindre kryss-kontaminering.
Når det gjelder medisinsk utstyr ombord-som pasientmonitorer, defibrillatorer og oksygentilførselssystemer-må spesialiserte rengjørings- og desinfeksjonsprosedyrer følges i strengt samsvar med protokollene for administrasjon av medisinsk utstyr. Spesiell forsiktighet må utvises for å forhindre at væsker trenger inn i det indre av disse enhetene, noe som kan kompromittere deres riktige funksjonalitet. I tillegg bør kjøretøyet gjennomgå periodisk grundig rengjøring og omfattende desinfeksjon; spesifikt, etter transport av pasienter med smittsomme sykdommer eller fullføring av oppdrag som involverer høy risiko for kontaminering, må strenge terminaldesinfeksjonsprotokoller utføres for å sikre at kjøretøyet konsekvent oppfyller alle sikkerhetskrav for medisinsk bruk.
